retour 

Principales réactions colorées des protides



Réaction du biuret Réaction xanthoprotéique Réaction à la ninhydrine
Réaction de Millon Réaction d'Adamkiewicz
ou d'Hopkins et Cole
Réaction du soufre



Principales réactions colorées des protides

Réaction
Groupes chimiques responsables
Mode opératoire
Résultats



Réaction
Groupes chimiques responsables
Mode opératoire
Résultats
Réaction du biuret
Liaisons peptidiques ( au moins deux) --CO--HN-- -- 3 à 4 ml de solution protéique -- 1 ml de Na OH à 20 % -- Quelques gouttes de CuSO4 à 1 % -- agiter doucement Coloration allant du rouge au violet


Réaction
Groupes chimiques responsables
Mode opératoire
Résultats
Réaction à la Ninhydrine
Molécules possédant un groupe -- NH2 et un groupe-- COOH libres ( sauf la Proline et l'hydroxyproline) quelques ml de solution protéique -- 1 ml de solution de ninhydrine(sol. à 1 % dans l'éthanol ou dans l'acétone ) -- porter au bain-marie bouillant pendant 1 minute Coloration allant du bleu au rouge violacé.



Réaction
Groupes chimiques responsables
Mode opératoire
Résultats
Réaction xanthoprotéique
Présence de noyaux aromatiques ( noyau benzénique) -- acides aminés de la série aromatique : tyrosine , tryptophane , phénylalanine. -- 3 à 4 ml de solution protéique -- 1 ml d'acide nitrique concentré -- porter à ébullition pendant 1 à 2 minutes. Coloration jaune .


Réaction
Groupes chimiques responsables
Mode opératoire
Résultats
Réaction de Millon
Groupement OH situé en para ou diortho dans un noyau benzénique -- réaction positive pour une protéine qui renferme de la tyrosine -- 5 ml de solution protéique -- 1 à 2 ml de réactif de millon( 188 ml d'acide nitrique ( d=1,42 ) avec 10 ml de mercure , diluer deux fois à l'eau distillée ) Agiter , il se forme un précipité blanc , chauffer doucement à la veilleuse du bec -- formation d'un coagulat rouge brique


.

Réaction
Groupes chimiques responsables
Mode opératoire
Résultats
Réaction d'Adamkiewicz ou réaction d'Hopkins et Cole
Noyau indole ; réaction positive pour les protéines contenant du tryptophane -- 5 ml de solution protéique -- 1 à 2 ml d'acide acétique impur , agiter,-- faire couler le long de la paroi du tube 3 à 4 ml d'acide sulfurique concentré . Apparition d'un anneau violet à la surface de séparation ( parfois lent à se former , attendre une dizaine de minutes) .


Réaction
Groupes chimiques responsables
Mode opératoire
Résultats
Réaction du soufre
Caractérisation de la méthionine , cystéine et cystine. -- 3 ml de solution protéique -- 3 ml de lessive de soude concentrée -- 10 gouttes d'acétate neutre de plomb à 10 % . Précipité noir de sulfure de plomb.





Bibliographie


gsvadmin@ac-toulouse