| CHAMPIGNONS ET LEVURES | BACTERIES | CULTURE IN VITRO |
Sordaria
Saccharomyces
Milieux sélectifs | 
Milieux sélectifspour bactéries | 
Saint Paulia
Oeillet
Menthe |
|
| Phosphate de potassium monopotassique | 50 g . L-1 |
| Phosphate de potassium dipotassique | 60 g . L-1 |
| Sulfate de magnésium | 50 g . L-1 |
| Acide citrique | 5 g |
| Sulfate de Zinc | 5 g |
| Ammonium-Fer Sulfate | 1 g |
| Sulfate de Cuivre | 0,25 g |
| Sulfate de Manganèse | 0,05 g |
| Acide Borique | 0,05 g |
| Molybdate d’Ammonium | 0,05 g |
| Chloroforme | 1 ml |
| Eau Distillée | 95 ml |
| solution de Phosphate monopotassique | 10 ml |
| solution de Phosphate dipotassique | 10 ml |
| solution de Sulfate de Magnésium | 10 ml |
| solution de Micro-éléments | 1 ml |
| Extrait de levure | 3 g |
| Glucose | 10 g |
| Agar agar | 20 g |
| Eau Distillée | ajuster à 1 litre |
| Les milieux de culture se conservent 2 à 3 semaines au frais ( retourner les boites pour éviter la condensation )
|
|
|
| -- extrait de levure ( autolysat de levure en poudre ) | 10 g . L-1 |
| -- peptone pepsique de viande ( ou bouillon ordinaire ) | 7 g . L-1 |
| -- glucose | 20 g . L-1 |
| Chauffer le mélange jusqu'à l'ébullition , répartir le milieu dans des tubes à cultures ( tubes de 16 x160 avec capsule à vis) et autoclaver pendant 20 minutes à 121°C ( conservation du milieu ainsi stérilisé , plusieurs mois au frais ) |
| Ce milieu s'utilise pour la culture des différentes souches de levures et essentiellement Saccharomyces Cerevisiae ( les levures produisant de grandes quantités de CO2 , prendre soin de ne pas fermer les tubes trop hermétiquement , risques d'explosions) |
| Après une incubation à 25°C pendant au moins 48 heures , les cultures ainsi réalisées se conservent au frais pendant 2 à 3 semaines et doivent être repiquées régulièrement. |
| -- extrait de levure ( autolysat de levure en poudre ) | 10 g . L-1 |
| -- peptone pepsique de viande ( ou bouillon ordinaire ) | 7 g .L-1 |
| -- Agar-agar | 20 g . L-1 |
| -- glucose | 20 g . L-1 |
| Porter le mélange à ébullition pendant une minute puis le répartir dans des flacons en verre et les stériliser à 121 °C pendant 20 minutes . |
| Couler le milieu de culture dans des boites de Pétri ( manipuler près d'un bec bunsen ) , laisser refroidir les boites puis les retourner pour éviter la condensation. |
| Après incubation comme pour le milieu liquide , les cultures se conservent au frais pendant 1 à 2 mois ( les repiquer , quand le milieu commence à se déshydrater ) |
|
| -- peptone pepsique de viande ( ou bouillon ordinaire ) | 7 g . L-1 |
| -- glucose | 20 g . L-1 |
| -- Agar-agar | 20 g . L-1 |
| -- chloramphénicol | 0,5 g.L-1 |
| Porter le mélange à ébullition pendant une minute puis le répartir dans des flacons en verre et les stériliser à 121 °C pendant 20 minutes . |
| Couler le milieu de culture dans des boites de Pétri ( manipuler près d'un bec bunsen ) , laisser refroidir les boites puis les retourner pour éviter la condensation. |
| -- peptone pepsique de viande ( ou bouillon ordinaire ) | 7 g . L-1 |
| -- glucose | 20 g . L-1 |
| -- Agar-agar | 20 g . L-1 |
| -- gentamicine | 0,040 g.L-1 |
| Porter le mélange à ébullition pendant une minute puis le répartir dans des flacons en verre et les stériliser à 121 °C pendant 20 minutes . |
| Couler le milieu de culture dans des boites de Pétri ( manipuler près d'un bec bunsen ) , laisser refroidir les boites puis les retourner pour éviter la condensation. |
|
| Composition du milieu | |
| Peptone de viande | 10 g.L-1 |
| Extrait de viande | 10 g.L-1 |
| Extrait de levure | 5 g.L-1 |
| Acétate de sodium | 5 g.L-1 |
| Phosphate bipotassique | 2 g.L-1 |
| Citrate d’ammonium | 2 g.L-1 |
| Sulfate de magnésium | 0,1 g.L-1 |
| Sulfate de manganèse | 0,05 g.L-1 |
| Glucose | 20 g.L-1 |
| Tween 80 (ou teepol ) | 1 ml |
| Porter le mélange à ébullition pendant 1 minute puis répartir dans des tubes à culture et stériliser à 121°C pendant 20 minutes. |
| Milieu permettant de mettre en évidence la présence ou l'absence d'une enzyme ( la Galactosidase ) chez différentes souches de bactéries. |
| Le milieu de culture est coloré en rose pourpre par le BCP et l'utilisation du lactose, présent dans le milieu, par les souches de bactéries possédant la galactosidase, fait virer l'indicateur au jaune ( production d'acide). |
| Composition du milieu | |
| Peptone | 5g.L-1 |
| Extrait de viande | 3g.L-1 |
| Lactose | 10g.L-1 |
| Agar-agar | 15g.L-1 |
| Bromocrésol pourpre | 0,025g.L-1 |
| Porter le mélange à ébullition pendant une minute puis le répartir dans des flacons en verre et les stériliser à 121 °C pendant 20 minutes . |
| Couler le milieu de culture dans des boites de Pétri ( manipuler près d'un bec bunsen ) , laisser refroidir les boites puis les retourner pour éviter la condensation. |
| Macro-éléments | Vitamines | ||
| Nitrate d’ammonium | 1650 mg | Pyridoxine chlorhydrate | 0,5 mg |
| Chlorure de calcium | 440 mg | Thiamine chlorhydrate | 0,5 mg |
| Sulfate de magnésium | 370 mg | Acide nicotinique | 0,5 mg |
| Nitrate de potassium | 1900 mg | Panthoténate de calcium | 0,5 mg |
| Phosphate monopotassique | 170 mg | Biotine | 0,05 mg |
| Micro-éléments | Méso inositol | 100 mg | |
| Chlorure de cobalt | 0,025 mg | Hormones | |
| Sulfate de cuivre | 0,025 mg | BAP ( benzylaminopurine) | 0,2 mg |
| Sulfate de fer | 27,85 mg | AIA ( acide indolacétique) | 0,2 mg |
| EDTA dissodique | 37,25 mg | ||
| Sulfate de manganèse | 22,30 mg | Saccharose | 20 g |
| Iodure de potassium | 0,83 mg | ||
| Molybdate de sodium | 0,25 mg | Agar-agar | 8 g |
| Sulfate de zinc | 8,6 mg | ||
| Acide borique | 6,2 mg | pH | 5,7 |
| Mélanger les différents éléments(dissoudre les hormones dans quelques gouttes d'alcool à 95 %) , ajuster à 1 litre avec de l'eau distillée , prendre le pH et ajuster éventuellement avec de l'acide Chlorhydrique dilué ou de la Soude diluée, porter à ébullition , répartir ensuite dans des flacons à culture ou dans des tubes et stériliser à 121°C pendant 20 minutes. Les micro-plants de Saint Paulia obtenus doivent être repiqués dans un milieu où l'on supprimera la benzylaminopurine et ou l'on divisera par deux la quantité de macro et de micro éléments . |
| Macro-éléments | Vitamines | ||
| Nitrate d’ammonium | 825 mg | Pyridoxine chlorhydrate | 0,5 mg |
| Chlorure de calcium | 220 mg | Thiamine chlorhydrate | 0,5 mg |
| Sulfate de magnésium | 185 mg | Acide nicotinique | 0,5 mg |
| Nitrate de potassium | 950 mg | Panthoténate de calcium | 0,5 mg |
| Phosphate monopotassique | 85 mg | Biotine | 0,05 mg |
| Micro-éléments | Méso inositol | 100 mg | |
| Chlorure de cobalt | 0,0125 mg | ||
| Sulfate de cuivre | 0,0125 mg | ||
| Sulfate de fer | 13,925 mg | ||
| EDTA dissodique | 18,625 mg | ||
| Sulfate de manganèse | 11,15 mg | Saccharose | 20 g |
| Iodure de potassium | 0,415 mg | ||
| Molybdate de sodium | 0,125 mg | Agar-agar | 8 g |
| Sulfate de zinc | 4,3 mg | ||
| Acide borique | 3,1 mg | pH | 5,7 |
| Mélanger les différents éléments ( dans ce cas l'utilisation d'hormones n'est pas indispensable , puisque la plante sera issue d'un bourgeon en latence ) , ajuster à 1 litre avec de l'eau distillée , prendre le pH et ajuster éventuellement avec de l'acide Chlorhydrique dilué ou de la Soude diluée, porter à ébullition , répartir ensuite dans des flacons à culture ou dans des tubes et stériliser à 121°C pendant 20 minutes. Les oeillets ainsi obtenus peuvent être ensuite repiqués sur un milieu identique mais avec addition d'acide indole-acétique pour favoriser la croissance des racines . |
| Préparation pour 1 litre de milieu |
| 500 ml de liquide de Knop ( voir préparation ) |
| le lait d'une noix de coco filtré |
| 10 g de saccharose |
| 6 g d'Agar-agar |
| Ajuster à 1 litre avec de l'eau distillée |
| Porter le mélange à ébullition , répartir dans des tubes à culture et stériliser 30 minutes à 120 °C |