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Substrats organiques




Solutions diverses Enzymes







Solutions organiques diverses

amidon :
- préparation d’un empois d’amidon (1 % ) :
- porter à ébullition 90 ml d’eau
- dans un tube à essai dissoudre 1 g de poudre d’amidon dans 10 ml d’eau, agiter ( lait d’amidon )
- verser cette suspension dans l’eau bouillante, agiter
- poursuivre l’ébullition 1 à 2 min



caséine :
- solution à 1% dans le CO3Na2 à 0.5% pH = 8.3 pour une hydrolyse par la pancréatine ( en milieu basique )



ovalbumine :
- mélanger un blanc d’oeuf cru à 1 litre d’eau
- porter le liquide à ébullition


Enzymes

Milieu de réaction
Bouche
Estomac
Intestin
pH du milieu
pH = 7
pH = 2
pH = 7-8
Enzymes
Amylase salivaire
Pepsine
Lipase , maltase , saccharase
, pancréatine , trypsine .



Hydrolases

Amylases

Alpha amylases

Amylase salivaire Salive diluée trois fois avec de l'eau à pH 7
-- Source : Glandes salivaires
-- Action : Amidon----> Maltose
-- Site d'action : bouche.
Amylase pancréatique Extrait frais de pancréas
-- Source : Pancréas
-- Action : Amidon----> Maltose
-- Site d'action :intestin grêle.
Maxilase Ecraser un comprimé dans un mortier avec 10 ml d'eau


Béta amylases

se rencontrent dans de très nombreuses graines à réserves amylacées
Grains d'orge germés de trois jours
-- Broyer 20 caryopses d'orge germés dans 25 ml de tampon phosphate pH 5,2 ou de l'eau distillée -- laisser reposer 5 minutes -- filtrer et compléter le filtrat à 50 ml avec du tampon -- stocker au réfrigérateur.
Amylase de blé germé .
-- poudre de germes de blé ( rayon diététique ) -- délayer 10 g de poudre de germes de blé dans 100 ml de tampon phosphate pH 5,3 ou d'eau distillée -- bien mélanger et filtrer .
Maltase

Mettre des levures en agitation , la veille en présence de 10 ml de solution de maltose pour 100 ml de suspension de levures ( il importe de cultiver au préalable les levures dans un milieu contenant du maltose pour induire la synthèse de maltase qui est une enzyme inductible )-- laisser décanter puis filtrer.
Maltase
-- Source :intestin grêle
-- Action : Maltose----> Glucose
-- Site d'action :intestin grêle.

Pancréatine

Pancréatine
Elle est à la fois douée d'une activité protéolytique ( trypsine ), amylolytique ( amylase ) et lipolytique ( lipase )

Pepsine

Pepsine
--Pepsine du commerce à 1%
-- Source :estomac
-- Action :Protéines---->Peptides
-- Site d'action :estomac.

Saccharase

Délayer 2 g de levure de bière de boulanger dans 20 ml d'eau -- laisser reposer un quart d'heure puis filtrer.
Saccharase
-- Source :intestin grêle
-- Action : Saccharose----> galactose et glucose
-- Site d'action :intestin grêle.

Trypsine

Trypsine
--Trysine du commerce à 1% (extrait de pancréas de porc )
-- Source :pancréas
-- Action :Protéines---->Peptides
-- Site d'action :intestin grêle.


Lipases
Lipase végétale
Extraction d'une lipase végétale -- mettre des grains de ricin ( 6 ) à tremper 6 à 8 heures avant la manipulation -- broyer au mixer avec quelques gouttes d'eau distillée-- laisser décanter et filtrer
Lipase
-- Source :pancréas
-- Action :Graisses---->Acides gras et glycérol
-- Site d'action :intestin grêle.


Bibliographie


gsvadmin@ac-toulouse