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Solutions tampon

Une solution tampon est une solution permettant de conserver un pH à peu près constant si on lui ajoute de faibles quantités d'acide ou de base.En effet , ces solutions réduisent au minimum les changements de concentration en ions H+ et OH- , elles acceptent des protons quand la solution que l'on ajoute en renferme trop ou en donnent quand la solution n'en a pas assez . Ces solutions sont constituées pour la plupart d'un mélange d'acide faible et de son sel ou de base faible et de son sel . Il y a une grande variété de solutions tampon , correspondant chacune à une zone de pH , les solutions suivantes permettent de couvrir des zones de pH allant de 2 à 9,6

Tampon phosphate-citrate (pH 2,2-8,0) Tampon phosphate (pH 5,6-8,0)
Tampon borate (pH 7,8-9,6) Tampon phosphate-saccharose
Tampon tris-saccharose Tampon pour mitochondries animales



1 ) Tampon phosphate-citrate (pH 2,2-8,0)


Préparer une solution d'acide citrique 0,50 M (soit105,06 g de C6H7O8, H2O sec par litre) et une solution de phosphate de sodium disodique 0,50 M (soit 71,01 g de Na2HPO4 sec par litre).

Mélanger suivant les indications du tableau et diluer à 200 ml.

pH
Na2HPO4
à 0,50M
Acide citrique
à 0,50M
pH
Na2HPO4
à 0,50M
Acide citrique
à 0,50M
2,2
1,60 ml
39,20 ml
5,2
42,88 ml
18,56 ml
2,4
4,96 ml
37,52 ml
5,4
44,60 ml
17,70 ml
2,6
8,72 ml
35,64 ml
5,6
46,40 ml
16,80 ml
2,8
12,68 ml
33,66 ml
5,8
48,36 ml
15,82 ml
3,0
16,44 ml
31,78 ml
6,0
50,52 ml
14,74 ml
3,2
19,76 ml
30,12 ml
6,2
52,88 ml
13,56 ml
3,4
22,80 ml
28,60 ml
6,4
55,40 ml
12,30 ml
3,6
25,96 ml
27,12 ml
6,6
58,20 ml
10,90 ml
3,8
28,40 ml
25,80 ml
6,8
61,80 ml
9,10 ml
4,0
30,84 ml
24,58 ml
7,0
65,88 ml
7,06 ml
4,2
33,12 ml
23,44 ml
7,2
69,56 ml
5,22 ml
4,4
35,28 ml
22,36 ml
7,4
72,68 ml
3,66 ml
4,6
37,40 ml
21,30 ml
7,6
74,92 ml
2,54 ml
4,8
39,44 ml
20,28 ml
7,8
76,60 ml
1,70 ml
5,0
41,20 ml
19,40 ml
8,0
77,80 ml
1,10 ml
2 ) Tampon phosphate (pH 5,6-8,0)


Préparer une solution de di-hydrogénophosphate de potassium à M/15 (soit 9,08 g de KH2PO4 par litre) et une solution de di-sodium hydrogénophosphate (9,47 g de Na2HPO4 par litre).

Mélanger suivant les indications du tableau.

pH
Na2HPO4
à M/15
KH2PO4
à M/15
5,6
10,0 ml
190,0 ml
5,8
16,5 ml
183,5 ml
6,0
25,0 ml
175,0 ml
6,2
36,0 ml
164,0 ml
6,4
53,5 ml
146,5 ml
6,6
74,5 ml
125,5 ml
6,8
99,0 ml
101,0 ml
7,0
122,0 ml
78,0 ml
7,2
143,0 ml
57,0 ml
7,4
161,0 ml
39,0 ml
7,6
172,5 ml
27,5 ml
7,8
182,5 ml
17,5 ml
8,0
189,0 ml
11,0 ml


3 ) Tampon borate (pH 7,8-9,6)


Préparer une solution d'acide borique et de chlorure de potassium 0,20 M (soit 12,41 g de H3BO3 sec et 14,91 g de KCI sec par litre) et une solution décarbonatée de soude 0,20 M (8,00 g de soude par litre). Ne pas chauffer l'acide borique au-dessus de 50 °C.

Mélanger suivant les indications du tableau et diluer à 200 ml.

pH
KCl,H2BO3
à 0,20 M
NaOH
à 0,20 M
7,8
50 ml
2,65 ml
8,0
50 ml
4,00 ml
8,2
50 ml
5,90 ml
8,4
50 ml
8,55 ml
8,6
50 ml
12,00 ml
8,8
50 ml
16,40 ml
9,0
50 ml
21,40 ml
9,2
50 ml
26,70 ml
9,4
50 ml
32,00 ml
9,6
50 ml
36,85 ml


Autres solutions tampon utilisées en physiologie


Tampon phosphate saccharose pH 6,5( physiologie végétale )

Solution tampon utilisée en physiologie végétale pour l'extraction de chloroplastes ou mitochondries ( cette solution est à conserver au froid à 4°C )
Ce tampon est essentiellement utilisé pour la réaction de Hill ou pour la respiration des mitochondries de cellules végétales.

Préparation pour 100 ml de tampon


di-hydrogénophosphate de potassium 1,36 g
di-sodium hydrogénophosphate 7,16 g
chlorure de potassium 0,59 g
saccharose 17,1 g
eau distillée ajuster à 100 ml


Tampon tris-saccharose pH 10,5


préparation pour 10 ml de solution


tris( hydroxyméthyl-aminométhane) 0,248 g
saccharose 1,026 g
eau distillée ajuster à 10 ml

Cette solution tampon est elle aussi utilisée pour l'extraction de chloroplastes ou de mitochondries végétales ( solution à conserver au froid )


Tampon pour mitochondries animales


tampon phosphate pH 7,2 100 ml
mannitol 13,6 g
Sérum Albumine Bovine 100 mg
KCl 10 mg

Bibliographie


gsvadmin@ac-toulouse