CHROMATOGRAPHIE DES ACIDES AMINES
Matériel nécessaire
-- cuves à chromatographie ( ou des pots à confiture )
-- des tubes capillaires étirés
-- papier chromato Whatman N° 1
-- solvant pour chromato
-- révélateur
-- étuve
-- solutions de sucres d’acides aminés
-- pulvérisateur
Préparation des différentes solutions
solutions d’acides aminés dans eau + 0,2 % HCl
-- glycine solution 0,01 mole . 100 m l -1
-- arginine solution 0,01 mole . 100 m l -1
-- méthionine solution 0,01 mole . 100 m l -1
-- valine solution 0,01 mole . 100 m l -1
-- leucine solution 0,01 mole . 100 m l -1
-- proline solution 0,01 mole . 100 m l -1
-- hydrolysât de caséine par la trypsine
-- caséine non hydrolysée
solvant de migration ( éluant ):
-- éthanol à 95 % 8 volumes
-- eau distillée 2 volumes
révélateur
-- Ninhydrine à 1 % dans l’alcool à 95
Manipulation élèves
-- Tracer sur la feuille à 1,5 cm du bas un trait au crayon
-- Faire avec le capillaire 2 gouttes de dépôt en séchant entre
chaque goutte
-- Une fois tous les dépôt fait, sécher la feuille l’introduire
dans la cuve,laisser migrer environ 30 minutes
-- Quand le front du solvant est à 1 cm du haut de la plaque,
sortir celle-ci de la cuve ,la déposer sur du papier
filtre la sécher au four
-- Pulvériser le révélateur et remettre au four pendant 5 à
10 minutes
Communiqué par : Michel Garcia Lycée
BOURDELLE Montauban.
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